Genomic DNA purification and amplification from scales to snake Bothrops atrox “lancehead” (Ofidia: Viperidae)
Rommel Rojas, Roberson Ramirez, Marianela Cobos y Juan Castro
Centro de Investigaciones de Recursos Naturales-CIRNAUniversidad Nacional de la Amazonia Peruana-UNAP. Apartado postal 496S Facultad de Ciencias Biológicas.
DOI: https://doi.org/10.33017/RevECIPeru2011.0052/
RESUMEN
Los estudios moleculares exigen la creación de nuevos protocolos que permitan obtener un ADN de alta calidad en la mayor cantidad de especies posibles y garantizar el conocimiento de la diversidad genética, por tal motivo el objetivo del presente trabajo fue purificar y amplificar de ADN genómico de las escamas de la serpiente Bothrops atrox “jergón”. Las escamas fueron recolectadas en el campo utilizando la técnica de revelamiento por encuentros casuales [1], para la purificación del ADN genómico se modificó el protocolo de [2], verificándose su pureza por el método electroforético utilizando agarosa 2% y su calidad y concentración por el método espectrofotométrico, la amplificación fue realizada por la reacción en cadena de polimerasaPCR utilizando iniciadores aleatorios. Los resultados muestran la obtención de ADN en excelente estado con un alto ratio de calidad (2) y concentración (585.85 µg/mL), asimismo se logró la amplificación del ADN, demostrándose que el protocolo utilizado es útil para estudios moleculares y genéticos. Se concluye mencionado que el método empleado es efectivo para obtener ADN de buena calidad en escamas de serpientes.
Descriptores: Serpiente, escama, ADN, reacción en cadena de polimerasa-PCR.
ABSTRACT
Molecular research demand the creation of new protocols and permit the obtain a high quality DNA in the most quantity of species and know the genetic diversity, for that objective of the present research was obtained the purification and amplification of scales DNA in the snake Bothrops atrox. the scales were recollected in the field using the visual encounter survey [5] The For the purification of the DNA was modification the protocol [4], the DNA purity was verifiable for the electrophoretic method and it quality and concentration for spectrophotometry, the amplification was carried for Polymerase chain reaction-PCR using random primers. The results show the successful DNA purification, showing an acceptable quality ratio (2) and concentration (585.85 µg/mL), at the same time was made the amplification of DNA for PCR. We conclude indicating the useful of this technique for the purification of high quality DNA from snake´s scales for molecular and genetic research.
Keywords: snake, scale, DNA, polymerase chain reaction-PCR.